Análisis de PCR en Diabetes Mellitus

Tema: Estudio génico (OPG, RANKL, Runx2 y receptores AGE) en cultivos de osteoblastos humanos de pacientes con diabetes mellitus tipo 2 y fractura de cadera. Influencia de los niveles de glucosa y AGEs.

Objetivo:Valorar si las variaciones de glucosa circulante generan alteraciones en la expresión de genes relacionados con la diferenciación y actividad osteoblástica (OPG, RANKL, Runx2 y AGER) en el cultivo primario de osteoblastos (hOB).

Muestra: Cultivos primarios de osteoblastos humanos (hOB) a partir de hueso trabecular.

Tipo de ácido nucleico: ARNm genómico

Extracción de ADN

Lisis: Kit High Pure RNA Isolation

Separación: Kit High Pure RNA Isolation

Purificación:  Kit High Pure RNA Isolation

Gen a amplificar: OPG, RANKL, Runx2 y AGER

Tipo de PCR: PCR en tiempo real

Pasos

• Desnaturalización
• Hibridación
• Elongación

Visualización: EFO

Bibliografía :

 http://www.revistadeosteoporosisymetabolismomineral.com/pdf/articulos/12012040100070014.pdf